小體積分光光度計,如 DeNovix DS-11 系列和 DS-8X 八通道分光光度計,能夠使用小至 0.5 (DS-11) 至 1 μL (DS-8X) 的體積進行定量測量。為了進行測量,目標樣品在上下采樣表面之間形成一個液橋。結(jié)果的精度取決于兩個測量表面之間校準距離的精度。本簡報將解釋 DeNovix SmartPath™ 技術(shù)如何確保測量距離(光程)保持在規(guī)格范圍內(nèi),從而獲得準確、可重現(xiàn)的結(jié)果。
DS 系列軟件在計算樣品濃度時使用 Beer-Lambert 方程。該方程將吸光度與光穿過樣品的濃度和光程相關(guān)聯(lián)。它通常寫成:
A = εbc
A:吸光度值
ε:吸收系數(shù),單位為 L /mol*cm
B:以 cm 表示的樣品光程
c: 溶液中樣品的濃度,以 mol/L 表示
較高濃度的樣品需要較短的光程。微量模式使用實時吸光度數(shù)據(jù)來確定每個樣品的最佳光程。軟件將根據(jù)需要自動將機械臂向下移動,以確保使用最佳光程進行測量。
例如,DS-11 系列微量模式使用的光程范圍為 0.5 mm 至 0.02 mm。
SmartPath 技術(shù)使用光機械組件和專有算法。它們共同提供精確的光程控制。
該技術(shù)使用細間距、高精度光學調(diào)節(jié)螺釘、高電機齒輪比和高分辨率控制將光程調(diào)整到 1 微米以內(nèi)。這可換算成 500 微米時為 +/- 0.2%,超短光程時為 +/- 3%。
DS-11 和 DS-8X 儀器使用參考位置,該參考位置在校準期間由我們工廠設(shè)置。每次啟動任何測量應(yīng)用程序時,都會知道相對于參考位置的確切電機位置。然后使用計算來確定移動到所需光程所需的電機旋轉(zhuǎn)次數(shù)。由于旋轉(zhuǎn)到光程的關(guān)系已得到很好的表征,因此很容易實現(xiàn)較短的光程。
在典型使用過程中,儀器使用專有軟件算法監(jiān)測光程精度,并根據(jù)需要進行必要的調(diào)整。
DeNovix DS-11 和 DS-8X 與 SmartPath 技術(shù)相結(jié)合,可提供精確的光程控制。